Glycopeptidesynthese

Glycopeptidesynthese|Geglycosyleerde peptiden|O-Gekoppelde glycopeptiden|N-Gekoppelde glycopeptiden|Wetenschap-Peptide

Heeft u glycopeptiden nodig voor glycobiologisch onderzoek of glycoproteïne-nabootsing? De wetenschap-PeptideGlycopeptide Synthese-service omvat O--koppeling, N--koppeling en introductie van complexe glycanen. 20 jaar ervaring, nauwkeurige controle van glycosylatieplaatsen. Neem gerust contact met ons op.

Waarom doe je glycopeptiden?
Eiwitten zijn zelden 'naakt' in het lichaam - de meeste bevatten suikers. Glycosylering beïnvloedt de vouwing, stabiliteit, herkenning en signalering van eiwitten. Als je de functie van een glycoproteïne wilt bestuderen, of een antilichaam tegen een glycaan-epitoop wilt ontwikkelen, is het niet voldoende om een ​​naakt peptide te hebben; je moet de glycanen eraan hechten.

 

De moeilijkheid van de glycopeptidesynthese ligt in de complexe structuur van de glycaanketen zelf en de noodzaak om de juiste plaats en de integriteit van de glycaanketen te garanderen wanneer deze aan het peptide is gehecht; O-conjugatie is prima, maar N-geconjugeerde glycaanketens zijn veel langer, waardoor de moeilijkheidsgraad van de synthese direct wordt verdubbeld. We zijn eerder in deze kuilen gestapt en we weten hoe we er omheen kunnen komen.

1. Type glycosylering: er worden zowel O-- als N--koppelingen gemaakt

Afhankelijk van uw onderzoeksdoelen zullen we bepalen welke glycosyleringsstrategie het meest geschikt is. De eerste stap bij de glycopeptidesynthese is het kiezen van de juiste suikerketen en -koppeling.

2. Lengte van de suikerketen: van monosachariden tot complexe suikerketens
Monosacharide-modificatie: GlcNAc, GalNAc, Man, Gal, enz., de eenvoudigste en meest succesvolle.
Disachariden/trisachariden: bijv. lactose en chitosan moeten goed beschermd worden door glycosyldonoren.
Complexe suikerketens: hoog mannosetype, complexe N-glycanen, maximaal negen suikers.
Sialylering: De terminale koppeling aan siaalzuur bootst de herkenningsplaats van natuurlijke glycoproteïnen na.

3. Puntcontrole: precisie, geen giswerk
Wat is de grootste angst voor glycosylatie? Glycoconjugatie op de verkeerde plaats, of de ene plaats is verbonden, maar de andere plaats niet. Met onze orthogonale beschermingsstrategie kunnen we glycosylatie op een specifieke locatie introduceren en de andere locaties intact laten. Moet u meerdere locaties glycosyleren? We kunnen ze één voor één introduceren en ze duidelijk controleren.

4. Zuiverheid: afhankelijk van experimentele vereisten

Elk glycopeptide gaat vergezeld van HPLC- en MS-rapporten, met gegevens die de integriteit van de glycaanketen en de juiste plaats ondersteunen.

5. Andere wijzigingen aan glycopeptiden
Glycopeptiden zijn op zichzelf al complex genoeg, maar sommige experimenten vereisen iets anders:
Fluorescerende etikettering: FITC, TAMRA, tracking van glycopeptidebestemming.
Biotine: trek het- naar beneden of test het.
Fosforylatie: Gelijktijdige simulatie van glycosylatie en fosforylatie om overspraak te bestuderen.
Isotopenlabeling: voor kwantificering van NMR of massaspectrometrie.

1. Glycochemie + peptidesynthese, twee-benadering
Glycopeptidesynthese is moeilijk omdat het twee velden kruist: de glycochemie en de peptidesynthese. Degenen die suiker maken, kennen peptide misschien niet, en degenen die peptide maken, kennen suiker misschien niet. We hebben mensen aan beide kanten, we bereiden de glycosyldonor zelf voor, optimaliseren de glycosylatieomstandigheden zelf, we hoeven het niet uit te besteden en we kunnen de problemen zelf aanpassen.

2. Flexibele beschermingsstrategieën en de integriteit van de suikerketen
Tijdens de glycosylering moet de suikerketen zelf worden beschermd, anders zullen de reactieomstandigheden de suiker uitschakelen. We hebben verschillende combinaties van beschermende groepen die de suikerketen kunnen stabiliseren onder omstandigheden van peptidesynthese, en vervolgens de suiker intact kunnen laten wanneer deze in de laatste stap wordt ontschermd.

3. Sitebeheer: maak verbinding waar u maar wilt
Single Site Glycosylatie: Suiker wordt op een specifieke locatie geïntroduceerd en elders naakt achtergelaten.
Glycosylatie op meerdere- locaties: verschillende locaties kunnen verschillende suikerketens dragen, die één voor één kunnen worden geïntroduceerd zonder elkaar te verstoren.
Selectieve glycosylatie: er zijn meerdere Ser/Thr, slechts één daarvan is geglycosyleerd - bereikt door conserveringsstrategie, niet door waarschijnlijkheid.

4. QC: Is de suikerketen intact? Kloppen de sites?
Glycopeptiden zijn lastiger voor kwaliteitscontrole dan gewone peptiden:

MS-molecuulgewicht: je kunt zien of de suiker vastzit of niet door ernaar te kijken.
MS/MS om de site te zien (optioneel): breek het peptide op om te zien aan welk aminozuur de suiker is gehecht.
HPLC om de zuiverheid te zien: zoek ook naar onzuiverheden van de ontsuikering.
Analyse van suikersamenstelling: meting van de samenstelling en koppelingen van suikerketens indien nodig.
De gegevens voor elk glycopeptide worden aan u gegeven, zodat u niet hoeft te raden.

5. Van milligram tot honderd milligram, helemaal tot het einde
Milligrammen voor de screeningsfase, tien milligrammen voor de validatiefase, honderd milligrammen voor het structurele onderzoek - we kunnen het allemaal hebben. Hetzelfde project, dezelfde tegenhanger, het is niet nodig om opnieuw te harmoniseren.

Structurele biologie NMR/kristalstructuur van homogene suikerketens van glycoproteïne, isotopische labeling

• Levering: Gevriesdroogd poeder, centrifugebuisjes of flesjes, beschermd door stikstof.
• Begeleidende documenten: COA (HPLC-profiel + MS-profiel), MS/MS (bevestiging van glycosylatieplaatsen).
• Optionele tests: peptidegehalte, endotoxine, vocht, analyse van de suikersamenstelling.
• Aangepaste verpakking: portieren en markeren volgens uw vereisten.
• Elk Glycopeptide Synthesis-product wordt dubbel-gecontroleerd voordat het wordt verzonden om er zeker van te zijn dat de suikerketen compleet is en dat de sites correct zijn.

Of u nu eenvoudige glycopeptiden wilt die zijn gemodificeerd met monosachariden, of complexe N-gekoppelde glycanen, we kunnen erover praten. Je hoeft tenminste niet aan beide kanten naar iemand te zoeken als je Science-Peptide vraagt ​​om de glycopeptidesynthese te doen.

Ik wil dat je me vertelt:
peptidesequenties
Glycosyleringsplaatsen en suikerketenstructuren (referenties zijn de beste)
Hoeveel (milligram)
zuiverheidseisen

Wanneer wil je het?
Geef u binnen 24 uur een haalbaarheidsbeoordeling en offerte.